deoxyribonucleic acid 是什么意思?
DNA[1]為英文Deoxyribonucleic acid的縮寫,中文譯名為脫氧核糖核酸,是染色體的主要化學(xué)成分,同時也是基因組成的,有時被稱為“遺傳微?!?。DNA是一種分子,可組成遺傳指令,以引導(dǎo)生物發(fā)育與生命機能運作。主要功能是長期性的資訊儲存,可比喻為“藍圖”或“食譜”。其中包含的指令,是建構(gòu)細胞內(nèi)其他的化合物,如蛋白質(zhì)與RNA所需。帶有遺傳訊息的DNA片段稱為基因,其他的DNA序列,有些直接以自身構(gòu)造發(fā)揮作用,有些則參與調(diào)控遺傳訊息的表現(xiàn)。
GeneTailor是什么意思?
說明:
GeneTailor? 定點誘變系統(tǒng)提供了一種簡單、方便、高效的方法來產(chǎn)生突變體目標蛋白。您可以獲得:
? 多達21 個核苷酸的堿基替換、刪除、或插入
? 多達96 個來自同一甲基化質(zhì)粒的不同定點突變的突變體
? 突變誘發(fā)效率大于80% 的定點突變
從任何來源分離出的DNA 都可以使用,不需要專門的載體、宿主菌株或限制性酶切位點。流暢的實驗方案能夠提供大于80% 的突變誘發(fā)效率,
可以節(jié)約時間,并易于適應(yīng)高、中、低通量的應(yīng)用。
GeneTailor? 系統(tǒng)的工作原理
GeneTailor? 系統(tǒng)誘發(fā)突變的過程可簡單地分為3 個步聚(圖1),只需轉(zhuǎn)化3 個小時,之后還要進行一次過夜培養(yǎng)。首先,用DNA 甲基化酶甲
基化目標DNA(最長可達8 kb,可以是源自任何細菌的分離產(chǎn)物)。然后用兩個重疊的引物進行誘發(fā)突變反應(yīng),其中的一個引物必需包含預(yù)期突
變。接下來,轉(zhuǎn)化突變的DNA。甲基化的親本DNA 將被宿主的核酸內(nèi)切酶消化,而未甲基化的誘變反應(yīng)產(chǎn)物會完整保留。不需要進行純化或額
外的消化。于第二天選取單菌落以驗證突變。
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